超临界流体色谱法和高效液相色谱法分离肾上腺素对映异构体

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采用高效液相色谱(HPLC)法与CO2超临界流体色谱(SFC)法,均使用Chiralpak AD-H色谱柱,建立并比较了2种肾上腺素对映体的拆分方法。HPLC法以正己烷∶异丙醇∶甲醇∶三氟乙酸∶乙醇胺(88∶7∶5∶0.2∶0.1)为流动相,SFC法以CO2∶甲醇(含0.2%三氟乙酸和0.1%乙醇胺)(90∶10)为流动相,检测波长均为280 nm。分别考察了改性剂种类及比例变化对拆分的影响,推测了2次出峰顺序反转现象的机制,并测定了3批肾上腺素样品中的对映体含量。肾上腺素及其对映异构体在HPLC法与SFC法中的分离度为2.95和1.86,均在0.010.10 mg/ml范围内线性关系良好。甲醇作为有机改性剂有利于对映体的洗脱和分离;酸碱改性剂同时加入可获得更佳的分离效果。HPLC和SFC法均可应用于肾上腺素对映异构体的拆分及定量,其中SFC法更加简便、高效、绿色环保。
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