【摘 要】
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目的 miR-21在恶性黑色素瘤进展中扮演癌基因的角色,但具体机制不清。本研究旨在探讨miR-21和蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型14(tyrosine-protein phosphatase non-receptor type
【机 构】
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西南医科大学附属医院皮肤科; 四川省人民医院皮肤科;
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目的 miR-21在恶性黑色素瘤进展中扮演癌基因的角色,但具体机制不清。本研究旨在探讨miR-21和蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型14(tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 14,PTPN14)的关系及其在恶性黑色素瘤中的表达和作用机制。方法通过RT-qPCR检测miR-21在恶性黑色素瘤细胞及正常黑色素细胞中的表达,转染miR-21inhibitors沉默恶性黑色素瘤A375细胞miR-21的表达,RT-qPCR检测其沉默效果及对PTPN14mRNA水平的影响;蛋白质印迹法检测其对PTPN14蛋白水平的影响;荧光素酶报告基因技术检测PTPN14是否为miR-21的直接靶基因;Transwell实验检测转染miR-21后A375细胞侵袭及迁移能力的变化。结果与人表皮黑色素(human epidermal melanoma,HEM)细胞相比,A375细胞中miR-21表达明显增高,t=2.732,P=0.029,转染miR-21inhibitors的A375细胞中miR-21的表达明显下调,F=9.415,P=0.021;下调A375细胞中miR-21表达可以促进PTPN14的表达、抑制细胞的侵袭(F=6.585,P=0.032)及迁移(F=8.351,P=0.019)能力,miR-21mimics可降低野生型PTPN14 3′-UTR的荧光素酶报告基因相对活性,t=3.42,P=0.035。结论 miR-21下调可以促进靶分子PTPN14的表达,阻滞恶性黑色素瘤细胞的侵袭及迁移。
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