【摘 要】
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目的 研究B族链球菌表面蛋白C5a肽酶(streptococcal C5a peptidase,ScpB)系统及其鼻内途径免疫后在小鼠血清及肺、直肠、阴道等黏膜部位特异性抗体水平,探讨ScpB蛋白黏膜免疫
【机 构】
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北京儿童医院微生物及免疫室,首都医科大学实验中心,山西医科大学寄生虫学教研室
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目的 研究B族链球菌表面蛋白C5a肽酶(streptococcal C5a peptidase,ScpB)系统及其鼻内途径免疫后在小鼠血清及肺、直肠、阴道等黏膜部位特异性抗体水平,探讨ScpB蛋白黏膜免疫应答的效果.方法 在大肠杆菌BL21中表达ScpB蛋白,亲和层析法进行纯化,质谱分析法对所纯化的蛋白进行鉴定.小鼠随机分为5组,每组10只.分别为对照组、皮下30μg组、鼻内5μg组、鼻内10μg组和鼻内30μg组.用ELISA法检测小鼠血清及黏膜萃取液中特异性抗体水平;调理吞噬试验检测SepB蛋白抗血清的保护性功能.结果 成功表达并纯化了ScpB蛋白;质谱分析和蛋白质库比较证实其为B族链球菌表面蛋白C5a肽酶的可能性分值为175;ELISA显示ScpB蛋白皮下30μg及鼻内不同剂量(5 μg、10 μg、30μg)免疫后均可诱发小鼠产生高水平特异性IgG抗体(P＜0.01),30 μg剂量组IgG大于5μg及10μg剂量组(P＜0.05);鼻内不同剂量(5μg、10μg、30μg)免疫后均可诱发小鼠产生高水平的黏膜特异性IgA抗体,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01);黏膜免疫组间无差异;30 μg ScpB蛋白皮下免疫后黏膜特异性IgA抗体与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).SepB抗血清对细菌具有调理吞噬作用,吞噬指数为12.3,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 B族链球菌表面蛋白C5a肽酶鼻内途径免疫小鼠后可在血清、肺及阴道、直肠等免疫近端和远端黏膜中产生相应高水平IgG及IgA抗体,上述ScpB抗体具有促进吞噬细胞吞噬B族链球菌的功能.
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