研究氯化消毒在不同环境条件下对抗生素抗性细菌大肠埃希菌(E. coli)HB101(pUC19质粒)的灭活规律以及对其抗生素抗性基因的转移和破坏机制。
方法将E. coli菌株与0.5、0.75、1.00、0.55 mg/L次氯酸钠作用后,分别在0.25、1、2、5、10、20、30 min的处理时间进行余氯测定、菌落计数,并采用消毒一级动力学模型和灭活动力学EFH模型进行拟合,获得E. coli的灭活曲线,同时,采用PCR技术进行抗生素抗性质粒pUC19质粒及其氨苄青霉素抗性基因(ampr)的检测,利用细菌转化试验评价抗生素抗性质粒的功能,计算达到不同的细胞杀灭对数值时的Ct值(t时刻的余氯浓度)。
结果消毒温度和pH值对水中E. coli的杀灭、pUC19质粒和ampr的破坏具有显著影响,当消毒温度为4、20、36 ℃时,细胞消灭对数值达到5时所需Ct值分别为11.92、10.28、7.67 min·mg/L。同时,当消毒pH分别为6.0、7.2、8.0,氯浓度分别为0.75、0.70、0.55 mg/L时,细胞消灭对数值达到5时所需Ct值分别为6.68、10.28、15.73 min·mg/L。pH 7.2且消毒温度为4、20、36 ℃,氯浓度分别为9、5、3 mg/L时,为完全破坏细胞外游离抗生素抗性质粒的转化功能,消毒所需Ct值分别为36.11、34.17、16.09 min·mg/L。次氯酸钠消毒会导致游离ampr基因甚至具有转化功能的完整质粒pUC19质粒释放,并污染水体,只有当Ct值达到903.03 min·mg/L之后,完整的ampr基因才能被消除,远远超过细菌致死Ct值。
结论次氯酸钠消毒过程中,抗生素抗性细菌E. coli全部被破坏,但其携带抗生素抗性的DNA片段(质粒和基因)仍可能保持完整性且具有转化功能。