甘蔗ABA信号转导关键酶SoSnRK2.1基因的克隆与表达分析

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蔗糖非酵解型蛋白激酶(SnRK)是植物体内ABA信号转导途径的关键调控酶,在植物的抗逆境生长过程中发挥着重要的作用。本研究利用RT-PCR和RACE-PCR技术,克隆出编码甘蔗SnRK2蛋白的基因SoSnRK2.1。该基因cDNA序列全长为1385 bp,包含一个1002 bp的开放阅读框(ORF)。根据氨基酸序列预测SoSnRK2.1基因编码333个氨基酸残基,与其他高等植物中相关蛋白的氨基酸具有高度的相似性,尤其是禾本科的玉米和水稻。构建该基因的原核表达载体pET-SoSnRK2.1,在IPTG诱导下可得到38 kD左右的蛋白,与理论值一致。实时荧光定量PCR分析表明,SoSnRK2.1基因在ABA、干旱(PEG)+ABA、干旱(PEG)、NaCl、低温(4℃)和H2O2外源胁迫下均呈诱导表达的趋势。推测该基因参与调控干旱、高盐和低温等胁迫过程,在甘蔗抗逆境胁迫中起重要作用。
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