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根据绵羊SRY（sex determining region of the Y）基因的723bp的高度保守序列设计跨度为193bp的两对巢式雄性特异引物，同时根据绵羊G—B-珠蛋白基因设计跨度为278bp的两对巢式引物为内标引物，通过析因设计法建立了巢式PCR体系，对公、母羊肝组织基因组进行巢式PCR扩增，经1．5％的琼脂糖电泳检测，公羊同时出现278bp的β-B-珠蛋白基因扩增带和193bp的雄性特异扩增带两条带，而母羊只扩增出278bp常染色体基因序列扩增带．用此巢式PCR体系扩增淋巴细胞，灵敏度≥1