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目的
应用人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSC)复合细胞外基质支架(extracellular matrix,ECM)初步构建组织工程化上皮补片,观察其形态特征和生物学行为。
方法将培养、纯化的hADSC与ECM支架复合培养,扫描电镜观察成膜后hADSC在ECM上的黏附特征,激光共聚焦显微镜检测hADSC在ECM支架上的活性和凋亡情况,荧光定量聚合酶链反应(qPCR)测定hADSC的自分泌功能[肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、表皮细胞生长因子(epidermal growth factor, EGF)]。
结果在ECM环境中,hADSC增殖活跃。扫描电镜显示ECM底部光滑,表面有粗细不一、广泛交联的胶原束,hADSC在ECM表面具有较好的黏附性,重叠生长。免疫荧光显示hADSC在ECM上增殖稳定,未出现大量凋亡。qPCR显示ECM培养组hADSC的分泌功能明显高于无支架组(P值均<0.05)。
结论hADSC与ECM支架有良好的相容性,在ECM环境中生长良好,并具有活跃的分泌功能。