大鼠成骨细胞系ROB—1的建立及氟对其DNA损伤的实验研究

来源 :中国预防医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yangbin0

【摘要】

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目的建立永生化大鼠成骨细胞系ROB-1并探讨氟对其DNA的损伤.方法用酶消化法原代分离SD胎鼠颅骨成骨细胞,用Lipofect AMINE作载体对其转染SV40大T基因,并经PCR法鉴定大T基因整

【作者】

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缪庆刘秉慈张绪超尤宝荣徐茗康宁

【机构】

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中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所

【出处】

：

中国预防医学杂志

【发表日期】

：

2002年3期

【关键词】

：

成骨细胞单细胞凝胶电泳 DNA损伤氟化物遗传毒性 Osteoblast SV40T Fluoride Single-cell gel electro

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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目的建立永生化大鼠成骨细胞系ROB-1并探讨氟对其DNA的损伤.方法用酶消化法原代分离SD胎鼠颅骨成骨细胞,用Lipofect AMINE作载体对其转染SV40大T基因,并经PCR法鉴定大T基因整合情况.采用碱性磷酸酶染色法鉴定转染细胞系中成骨细胞的纯度;采用单细胞凝胶电泳(SCGE)方法检测2.0～3.0 mmol/L氟化钠染毒24h对成骨细胞DNA损伤情况.结果转染后成骨细胞的基因组中整合有SV40 T基因,碱性磷酸酶染色阳性细胞占95%以上;单细胞凝胶电泳发现NaF可不同程度地诱导细胞DNA链断裂,

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