【摘 要】
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目的研究结肠癌细胞对17-AAG的获得性耐药,以及耐药细胞株的生物学特性改变。方法培养结肠癌细胞SW480、SW620,用SRB法检测其17-AAG的IC50;通过17-AAG浓度递增法诱导培养建立
【机 构】
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昆明医科大学第三附属医院肿瘤研究所,昆明医科大学第一附属医院影像中心,昆明医科大学第三附属医院姑息科
【基金项目】
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云南省应用基础研究计划项目(2011FZ108),国家自然科学研究基金项目(81660417)
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目的研究结肠癌细胞对17-AAG的获得性耐药,以及耐药细胞株的生物学特性改变。方法培养结肠癌细胞SW480、SW620,用SRB法检测其17-AAG的IC50;通过17-AAG浓度递增法诱导培养建立耐药细胞株;用克隆形成实验检查细胞克隆形成能力,用Transwell小室法检测细胞迁移能力;用蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测上皮-间质细胞转化(EMT)分子标志物的表达。结果经过6～8周17-AAG诱导培养,得到稳定的耐药细胞株SW480-R;与母细胞相比,SW480-R细胞呈现EMT的表型特征;SW480-R克隆形成和迁移能力显著高于其母细胞(P<0.05);SW480-R细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达下调(P<0.05),而N-钙黏蛋白(N-cadherin)和β-连环素(β-catenin)的表达显著上调(P<0.05)。结论17-AAG可诱导结肠癌细胞产生获得性耐药,耐药细胞株显示浸润转移的特性,其机制可能与耐药细胞株发生EMT有关。
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