【摘 要】
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为构建高酶活力天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK),并削弱或解除Lys(lysine)反馈抑制作用突变体,通过定点突变和高通量筛选技术构建突变体M372I,T379S和M372I-T379S,对野生型(W
【基金项目】
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国家自然科学基金(批准号:31771957);长春市科技创新“双十工程”项目(批准号:17SS030)
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为构建高酶活力天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK),并削弱或解除Lys(lysine)反馈抑制作用突变体,通过定点突变和高通量筛选技术构建突变体M372I,T379S和M372I-T379S,对野生型(WT)和突变体分别进行诱导表达、纯化及酶学性质表征.结果表明:突变体M372I,T379S和M372I-T379SAK与WTAK相比,Vmax分别提高了13.77,15.02,15.60倍,Km和n值均降低;最适pH值分别升高为8.0,8.5,8.5,且半衰期分别延长了1.0,0.9,2.3h;
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