【摘 要】
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3-甾酮-△1-脱氢酶是甾体母核降解的关键酶,能催化3-甾酮化合物在C1,2位处脱氢,提高原有底物的生物活性.利用表达载体pET-30a,实现了简单节杆菌3-甾酮-△1-脱氢酶在大肠杆菌B
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3-甾酮-△1-脱氢酶是甾体母核降解的关键酶,能催化3-甾酮化合物在C1,2位处脱氢,提高原有底物的生物活性.利用表达载体pET-30a,实现了简单节杆菌3-甾酮-△1-脱氢酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效表达.利用SDS-PAGE分别对超声破碎后的上清和沉淀进行分析,并用分光光度法检测酶的活力.结果表明,表达出的蛋白主要以无活性的包涵体形式存在,利用Ni离子螯合层析的方法纯化融合蛋白,复性后的酶活比简单节杆菌提高了近10倍.
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