模拟深埋条件下持续性挤压伤复合低氧缺水缺食诱导肝细胞凋亡及其机制研究

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目的 研究模拟深埋条件下持续性挤压伤复合低氧缺水缺食大鼠的肝细胞凋亡规律及其机制.方法 Wistar雄性大鼠144只,随机分为对照组、单纯挤压组(单挤组)、低氧缺水缺食组(三缺组)、挤压伤复合低氧缺水缺食组(复合组),采用钳夹双后肢近端方法建立挤压伤模型[压力为(44.1±2.9)N],于致伤后1、3、5d活杀取材,各时间点每组6只,常规制片,采用原位末端标记法(TUNEL)检测肝细胞凋亡,免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)对肝脏组织中凋亡相关因子Bax、Bcl-2进行平均光密度(MOD)定量检测.结果 ①凋亡指数:与正常对照组比较,单挤组、三缺组和复合组肝细胞凋亡指数于1~5d呈现逐步增高趋势,差异具有统计学意义(P <0.05,P<0.01),其中复合组尤为明显.②凋亡相关因子Bax表达逐渐增强,MOD值逐渐增高,单挤组、三缺组和复合组于1~5d均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01);Bcl-2表达呈进行性减弱,MOD值进行性下降,与对照组比较,其中单挤组和三缺组在3d和5d差异具有统计学意义(P <0.05,P<0.01),复合三缺组下降最明显,于1~5d差异均有统计学意义(P <0.05,P<0.01),并依次显著低于前两组.结论 无论挤压或三缺均会导致大鼠肝细胞凋亡指数增加,复合组尤为明显,具有高发性、速发性、进行性、累及细胞多样性特点;Bax和Bcl-2参与肝损伤过程.
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