目的:了解并分析2014年南京医科大学第一附属医院中段尿培养阳性标本的病原菌分布、构成及耐药状况,为临床合理使用抗菌药物提供实验依据。方法:细菌、真菌鉴定采用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统或API鉴定系统,细菌药物敏感性测定采用Kirby-Bauer纸片扩散法,真菌药物敏感性测定采用ATB FUNGUS 3板条,应用WHONET5.6软件进行统计分析。结果:2014年共送检5 172份中段尿标本,分离出1 326株病原微生物,阳性率25.6%。革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌分别占72.0%、19.6%、8.4%。革兰阴性杆菌对碳青霉烯类抗菌药、革兰阳性球菌对万古霉素和利奈唑胺仍高度敏感;真菌对两性霉素B、伏立康唑高度敏感。检出亚胺培南和美洛培南同时耐药的大肠埃希菌3株、肺炎克雷伯5株;检出5株万古霉素耐药屎肠球菌。结论:大肠埃希菌是泌尿系感染主要致病菌,多种病原菌对临床常用抗菌药物耐药性日趋严重。