【摘 要】
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目的 :获得含人乳头瘤病毒 (HPV) 5 8型E6基因的克隆及表达重组体并体外表达E6蛋白 .方法 :聚合酶链方法从 1例宫颈腺癌患者癌组织DNA中获得HPV5 8E6基因 ,并将其与克隆载体p
【机 构】
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第四军医大学全军基因诊断研究所,西安交通大学第二医院妇产科
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目的 :获得含人乳头瘤病毒 (HPV) 5 8型E6基因的克隆及表达重组体并体外表达E6蛋白 .方法 :聚合酶链方法从 1例宫颈腺癌患者癌组织DNA中获得HPV5 8E6基因 ,并将其与克隆载体pGEM TEasy连接 ,获得重组体HPV5 8 E6 pGEM T ,继之以双酶切将E6基因与同样双酶切的线性化的pRSET A表达载体连接 ,得到E6表达重组体pRSET 5 8E6 ,转化E .coliBL2 1 (DE3) ,用IPTG诱导表达 .结果 :从 1例宫颈癌患者中成功获得了少见HPV5 8型的E6基因并构建了其重组表达载体 .经IPTG诱导后可表达Mr2 4 0 0 0的 6HisHPV5 8E6融合蛋白 ,表达量占菌体蛋白的 1 0 % .结论 :成功获得了少见HPV5 8高危型的E6基因 ,并可在E .coli中高效表达
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