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目的
探讨听泡穿刺注射法建立小鼠急性中耳炎模型的可行性和实用性。
方法采用听泡穿刺注射的方法建立C57BL/6小鼠急性中耳炎模型,造模组注射5 μl肺炎链球菌19F悬液(1×107 CFU/ml),对照组注射等量无菌磷酸盐缓冲液。观察注射后小鼠行为变化,分别于建模后12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d处死小鼠,分离中耳组织HE染色观察病理改变,同时收集中耳灌洗液检测炎性细胞数量、细菌载量及相关炎性因子含量。
结果接种1 d后,中耳腔内细菌迅速增殖,产生大量肿瘤坏死因子α(TNF–α)、白细胞介素6(IL–6)和白细胞介素1β(IL–1β),中耳黏膜基质内血管扩张充血,以中性粒细胞为主的炎性细胞逐渐渗出;接种2~3 d后细菌载量开始降低,炎性因子表达水平下降,但中耳腔内炎性细胞浸润及黏膜增厚达最高水平;接种5~7 d后,细菌基本被清除,中耳炎性反应逐渐消退。
结论听泡穿刺注射方法可成功构建C57BL/6小鼠急性中耳炎模型,具有较好的可行性和实用性。