背景:hoechst33342可以用于对骨髓间充质干细胞的标记,但是其标记的最佳浓度的研究目前尚未见报道。目的:观察不同浓度的Hoechst33342对大骨髓间充质干细胞的增殖、标记率的影响,以及其荧光持续时间。方法:贴壁筛选提取大鼠骨髓间充质干细胞,培养至第3代,流式细胞仪检测其表面抗原,成骨、成脂诱导后染色,用不同浓度Hoechst33342标记大鼠骨髓间充质干细胞后,检测标记后的大鼠骨髓间充质干细胞增殖率、标记率,荧光显微镜下观察其持续时间。结果与结论:①hoechst33342可以用于骨髓间充质干细胞的标记,其最佳标记浓度为5mg/L,标记持续时间较长,30d未见猝灭。②其荧光激发后对细胞有损伤作用,标记浓度超过10mg/L时,可致细胞死亡。③标记浓度在7.5mg/L时,细胞增殖受到抑制;标记浓度在2.5mg/L时,标记时间较短,7d时荧光减弱,14d荧光消失。结果表明,hoechst33342可用于骨髓间充质干细胞的标记,其对骨髓间充质干细胞标记的最佳浓度为5mg/L;细胞表型鉴定CD45阴性,CD44,CD90均呈阳性表达。