论文部分内容阅读
目的 筛选膀胱移行细胞癌(TCC)高表达基因UroplakinⅡ(UPⅡ)的反义结合位点(AAS).方法合成20聚随机寡核苷酸文库,与全长UPⅡcRNA杂交,RNase H酶切割后,经引物延伸、放射自显影、RNADraw软件分析,筛选UPⅡmRNA的AAS,合成反义寡核苷酸(AS-ODN),转染RT4细胞株18 h后,RT-PCR检测UPⅡmRNA水平.结果筛选出4个具有茎环结构的AAS(558~577 bp、552~571 bp、217~236 bp、97~116 bp),AS-ODN对UPⅡmRNA的封闭效率分别为29.3%(P<0.01)、82.7%(P<0.01)、71.3%(P<0.01)、70.9%(P<0.01).结论随机寡核苷酸文库/RNase H酶切割法能在体外筛选出UPⅡmRNA的AAS,为研究UPⅡ生物学功能、TCC靶向生物治疗奠定了基础。