直接免疫荧光法和实时荧光定量PCR法检测汉坦病毒效果的比较

来源 :中华预防医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuzheng80927
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目的 比较直接免疫荧光法(DFA)和实时荧光定量PCR法检测鼠肺汉坦病毒(HV)带毒效果的差异.方法 于2012年4-10月在陕西省户县、泾阳县和眉县3个肾综合征出血热(HFRS)高发县的居民区和野外鼠类活动地,采用鼠夹法捕获野鼠和家鼠共479只.解剖取鼠肺,1份鼠肺经冰冻切片后免疫荧光染色检测HV抗原,另l份经抽提组织RNA后应用实时荧光定量PCR法检测HV核酸.比较2种方法的病毒阳性检出率和检测结果的一致性.结果 捕获的479只鼠中,包括家鼠105只、野鼠374只.DFA和实时荧光定量PCR两种方法在家鼠肺中均未检出HV,而DFA法检测野鼠带毒率为13.1% (49/374),实时荧光定量PCR法检测野鼠带毒率为14.7%(55/374),差异无统计学意义(x2=0.402,P=0.526).对每份鼠肺标本分别检测,DFA法检测鼠肺HV带毒率为10.2%(49/479),实时荧光定量PCR法检测带毒率为11.5% (55/479),两种方法比较差异无统计学意义(x2=1.286,P=0.257),检测结果Kappa一致性系数(K)为68.2%,两种方法结果有高度一致性(u =11.759,P<0.05).以DFA法为标准,实时荧光定量PCR法在检测鼠肺HV的灵敏度为77.6%(38/49),特异度为96.1% (413/430).DFA检测的9个疑似阳性结果中6个被实时荧光定量PCR方法证实,3个被否定.结论 与DFA法相比,实时荧光定量PCR法同样可用于检测鼠肺中HV带毒率,而且结果更稳定。

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