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目的克隆刚地弓形虫ROP18基因,进行原核表达及重组蛋白的免疫分析。方法提取弓形虫RH株基因组DNA,经PCR获得ROPl8基因片段,经双酶切分别连入原核表达载体pET28a(+)和pET-32a(+),构建重组表达载体pET28a—ROP18和pET32a—ROP18,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导表达后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳及Western—blot检测。结果PCR得到约1665bp目的基因片段,单、双酶切及PCR鉴定结果显示成功构建重组表达载体pET28a—ROP18和p