龟裂链霉菌zwf2基因阻断提高土霉素生物合成

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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)是链霉菌磷酸戊糖途径中第一个酶(“看家”酶),也是形成NADPH的关键酶,由zwfl和zwf2基因编码。以温敏型质粒pKCll39为基础构建了用于阻断龟裂链霉菌zwf2的重组质粒pKC1139-zwf2’,通过大肠杆菌GM2929去甲基化pKC1139-zwf2’后电转至原始龟裂链霉菌M4018感受态细胞,筛选得到转化子。转化子进一步通过PCR鉴定和点杂交印迹分析鉴定,证明是zwf2基因阻断的阳性突变子命名为M4018-△zwf2。以原始菌株为对照,突变子摇瓶发酵结果表
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