人新型肿瘤坏死因子在E.coli中的高效表达、纯化及诱导凋亡活性

来源 :武汉大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：errorli

【摘要】

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采用PCR技术获得了新型的人肿瘤坏死因子基因，在153位氨基酸处引入突变，使Gly突变为Leu.将突变体hTNF基因克隆到表达载体pQE30中，SDS-PAGE结果显示经IPTG诱导后，hTNF基因获得大量

【作者】

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王晓玲叶林柏郜金荣徐进平曾晖

【机构】

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武汉大学病毒研究所

【出处】

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武汉大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2001年2期

【关键词】

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肿瘤坏死因子-Α 表达基因突变凋亡活性纯化抗肿瘤作用大肠杆菌 TNF-α expression gene mutagenesis apoptosis

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采用PCR技术获得了新型的人肿瘤坏死因子基因，在153位氨基酸处引入突变，使Gly突变为Leu.将突变体hTNF基因克隆到表达载体pQE30中，SDS-PAGE结果显示经IPTG诱导后，hTNF基因获得大量表达.通过Ni金属鳌合层析柱亲和层析获得到纯化的hTNF融合蛋白，Western blot结果表明hTNF蛋白可与抗TNF的抗血清发生特异性反应.荧光染色实验检测了hTNF蛋白诱导细胞发生凋亡的活性.

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