结核分枝杆菌Rv0577基因在毕赤酵母的表达及重组抗原活性鉴定

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lym66688

【摘要】

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目的在毕赤酵母表达结核分枝杆菌Rv0577基因并鉴定重组蛋白抗原活性。方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv扩增Rv0577基因,TA克隆进入pGEM-TEasy载体,再亚克隆进入pPICZαA。重

【作者】

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邓艳琴王加熊肖方震何似王灵岚严延生

【机构】

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福建省疾病预防控制中心,福建医科大学

【出处】

：

中国人兽共患病学报

【发表日期】

：

2008年11期

【关键词】

：

结核分枝杆菌 Rv0577 毕赤酵母基因表达抗原性 Mycobacterium tuberculosis Rv0577 gene Pichia pasto

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目的在毕赤酵母表达结核分枝杆菌Rv0577基因并鉴定重组蛋白抗原活性。方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv扩增Rv0577基因,TA克隆进入pGEM-TEasy载体,再亚克隆进入pPICZαA。重组质粒pPICZαA-Rv0577经双酶切鉴定并测序证实,线性化后电转化导入毕赤酵母X-33表达;采用Western blot和Dot blot鉴定抗原活性。结果双酶切及测序鉴定均证实获得Rv0577基因的正确克隆。pPICZαA-Rv0577在X-33分泌表达的目的蛋白,通过硫酸铵沉淀、HPLC顺序纯化,获得的

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