【摘 要】
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目的 本项研究将已构建的编码pac结构基因A-P片段的重组质粒pCIA-P免疫Wistar大鼠,观察重组表面蛋白抗原PAc在大鼠体内不同组织中的原位表达以及免疫定菌鼠后的防龋效果.方法
【机 构】
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430079,武汉大学口腔医学院牙体牙髓科
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目的 本项研究将已构建的编码pac结构基因A-P片段的重组质粒pCIA-P免疫Wistar大鼠,观察重组表面蛋白抗原PAc在大鼠体内不同组织中的原位表达以及免疫定菌鼠后的防龋效果.方法重组质粒pCIA-P经股四头肌肌肉注射和颌下腺区皮下注射两种途径免疫大鼠,以免疫组化技术观察重组蛋白PAc在免疫部位的表达.采用股四头肌肌肉注射、颌下腺区皮下注射和颊粘膜下注射3种方法免疫定菌鼠,ELISA法检测血清和唾液中特异性抗体水平,Keyes计分法评估免疫定菌鼠后鼠磨牙的患龋情况.结果大鼠股四头肌细胞中可见PAc蛋白不均匀的受限表达,双侧颌下腺组织均可检测到PAc蛋白的阳性染色,在导管内表达呈强阳性.用重组质粒pCIA-P经颌下腺区皮下注射和颊粘膜免疫的方法可显著增加唾液中抗PAc-IgA水平和血清中特异性抗PAc-IgG水平.重组质粒免疫定菌鼠后能显著降低定菌鼠龋损计分.特别是颌下腺区皮下和颊粘膜注射免疫组,大鼠牙本质龋的破坏程度明显低于其他组.结论重组质粒pCIA-P是一种有效的免疫原,粘膜免疫是较理想的DNA防龋疫苗的接种途径.
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