【摘 要】
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目的研究跨膜蛋白35（T MEM35）基因在肝癌细胞生长、细胞周期中的作用,探讨跨膜蛋白TMEM35作为潜在肝癌治疗靶点的可行性。方法利用跨膜蛋白二级结构预测工具SPLIT对TMEM35蛋白
【机 构】
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华东理工大学生物工程学院,国家人类基因组南方研究中心上海市疾病与健康基因组学实验室
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目的研究跨膜蛋白35（T MEM35）基因在肝癌细胞生长、细胞周期中的作用,探讨跨膜蛋白TMEM35作为潜在肝癌治疗靶点的可行性。方法利用跨膜蛋白二级结构预测工具SPLIT对TMEM35蛋白的二级结构进行分析;利用实时定量多聚酶链反应技术检测TMEM35基因在肝癌患者癌组织及相应癌旁组织中的表达情况;采用化学合成干扰小RNA片段（siRNA）干扰TMEM35基因在肝癌细胞MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,通过软琼脂克隆形成实验观察肝癌细胞非贴壁依赖性克隆生长情况,流式细胞术分析细胞周期;通过蛋白功能相互作用网络数据库STRING推测TMEM35蛋白发挥相应功能的搭档基因。结果 TMEM35为具有4个跨膜结构域的四跨膜蛋白,实时定量多聚酶链反应检测发现TMEM35基因在肝癌中表达紊乱,其中与相应癌旁组织相比较,TMEM35在14例癌组织中表达显著上调,在20例癌组织中表达显著下调（P<0.05）。针对TMEM35基因设计合成siR NAs能够特异性沉默TMEM35基因在肝癌细胞株MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,并且肝癌细胞在软琼脂培养条件下,形成的克隆显著减少。流式细胞术分析发现干扰TMEM35基因表达,能够减缓细胞周期进展,表现为细胞G1期增多,S期减少。结论 TMEM35基因编码具有四跨膜结构域的膜蛋白,在肝癌细胞生长中发挥重要作用。
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