野生型Ⅱ型神经纤维瘤病基因Ⅱ亚型真核表达载体的构建及其功能

来源 :中国现代神经疾病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:beichen35
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目的构建野生型Ⅱ型神经纤维瘤病基因(NF2)Ⅱ亚型的真核表达载体,观察其在人胚胎肾细胞293(HEK293)中的表达并检测其转染神经鞘瘤细胞(RT4)后的功能。方法以人胎脑cDNA文库中的NF2Ⅱ亚型基因为模板.应用聚合酶链反应技术扩增野生型NF2Ⅱ亚型基因,并定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1质粒中:经鉴定正确的重组质粒pEGFP-NF2Ⅱ亚型,用Lipofectamine2000脂质体导人人胚胎肾细胞293,通过荧光显微镜和Western Blotting法观察基因表达水平:随后转染大鼠神经鞘瘤细
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