含人p27基因的重组腺病毒的构建及鉴定

来源 :中国康复 | 被引量 : 0次 | 上传用户：luoch668

【摘要】

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目的：构建并鉴定含有人p27基因和EGFP基因的重组腺病毒载体，并观察其表达。方法利用腺病毒载体系统Adeno-X，通过质粒抽提、电泳、酶切、连接、转化等多种基因工程技术，构建重组腺

【作者】

：

徐逸朱舟吴柯陈曦林何文涛曾宁陈忠华

【机构】

：

华中科技大学同济医学附属同济医院器官移植研究所

【出处】

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中国康复

【发表日期】

：

2008年4期

【关键词】

：

P27 腺病毒细胞周期慢性移植肾失功 p27 adenovirus cell cycle chronic graft dysfunction

【基金项目】

：

国家973高科技计划基金资助项目（2003CB5155）

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目的：构建并鉴定含有人p27基因和EGFP基因的重组腺病毒载体，并观察其表达。方法利用腺病毒载体系统Adeno-X，通过质粒抽提、电泳、酶切、连接、转化等多种基因工程技术，构建重组腺病毒质粒pAdeno-p27-EGFP；酶切、PCR鉴定重组腺病毒质粒；利用293细胞包装重组腺病毒载体PAd-p27-EGFP，通过荧光倒置显微镜观察EGFP的表达。结果：经酶切和PCR鉴定，成功构建重组腺病毒质粒pAdeno-p27-EGFP，利用脂质体转染人293细胞后，转染腺病毒质粒pAdeno-p27-EGFP可见E

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