携带人分泌型内皮抑素基因重组腺病毒的制备和鉴定

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fangming286

【摘要】

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目的制备包含人分泌型内皮抑素基因的重组腺病毒，为下一步探讨其在血管生成依赖性疾病的治疗研究中的应用提供基础。方法以T—Endostatin质粒为模板，通过PCR扩增回收hEndostati

【作者】

：

袁瑷芹何援利杨芳刘木彪

【机构】

：

南方医科大学珠江医院妇产科

【出处】

：

南方医科大学学报

【发表日期】

：

2006年12期

【关键词】

：

人内皮抑素腺病毒抗血管生成真核表达 human endostatin adenovirus antiangiogenesis eukaryotic

【基金项目】

：

广东省科技厅科技计划项目（2003B30502）

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目的制备包含人分泌型内皮抑素基因的重组腺病毒，为下一步探讨其在血管生成依赖性疾病的治疗研究中的应用提供基础。方法以T—Endostatin质粒为模板，通过PCR扩增回收hEndostatin，将hEndostatin连接到pShuttle2中，构建pShuttle2-hEndostatin表达质粒，将此表达质粒连接到缺陷型腺病毒载体，构建Ad-hEndo。其线性化后转染HEK293T细胞，纯化后的重组腺病毒Ad—hEndo在HEK293T细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化．并测定其滴度。结果利用

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