转基因玉米PCR检测体系的优化研究

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以转基因玉米为研究材料,从模板DNA的提取质量、Mg2+浓度、退火温度、引物用量等方面对PCR检测体系进行优化,建立了检测转基因玉米中外源基因的有效PCR反应体系。在优化体系中,25mm ol/LMg2+用量由1.5μl降低为1.2μl,12.5mm ol/L引物用量由1μl降低为0.5μl,退火温度提高2℃。TouchDown PCR反应条件:95℃5m in;95℃1m in,62.5℃1m in(以后每个循环递减1℃),72℃1m in,循环15次;95℃1m in,57.5℃1m in,72℃1m
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