猪传染性胃肠炎病毒核衣壳蛋白的表达及在ELISA中的初步应用

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重组质粒PET-N转化大肠杆菌(Escherichia coil)BL21菌株,在1.0mmol/LIPTG和37℃条件下诱导,外源基因获得高效表达。Western blot检测证明,表达产物具有良好的反应原性。以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪传染性胃肠炎抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为15μg/mL,抗体稀释度1:40,最适封闭液为5%FBS,血清反应时间为90min,酶标二抗HRP SPA的工作浓度为1:5000,反应时间为60min,底物在室温显色时间为10min,待检血清阳性标准定为
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