【摘 要】
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应用噬菌体表面展示技术,从生长抑素免疫的BALB/C小鼠(mus musculus)脾脏中提取总RNA,用RT-PCR技术反转录成cDNA,通过PCR扩增出抗体重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,再用编
【机 构】
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华中农业大学动物科技学院动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,华中农业大学动物医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.30771549)和国家支撑计划项目(No.2006BAD14808-02)资助.
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应用噬菌体表面展示技术,从生长抑素免疫的BALB/C小鼠(mus musculus)脾脏中提取总RNA,用RT-PCR技术反转录成cDNA,通过PCR扩增出抗体重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,再用编码(G1y4Ser)3的Linker在体外将VH和VL连接成单链抗体(ScFv)基因,克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化至感受态的大肠杆菌(Escherichia coli)TG1,经辅助噬菌体M13K07超感染,形成噬菌体单链抗体库。经检测,噬菌体的滴度为3.5×1011pfu,有
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