荧光定量PCR检测牛瑟氏泰勒虫方法的建立

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本试验旨在建立快速诊断牛瑟氏泰勒虫的荧光定量PCR检测方法.以常规PCR方法扩增牛瑟氏泰勒虫P33基因,将其克隆至载体pMD-18T,然后进行质粒标准品的构建,以此为模板建立牛瑟氏泰勒虫P33基因TaqMan荧光定量PCR和SYBR Green荧光定量PCR检测方法.结果显示:2种方法均能检测到2.26~2.26×108 copies/μL范围,特异性试验中与其他病原体均无特异性扩增曲线,批内和批间变异系数都小于4%.鉴于2种方法均具有较好的敏感性、特异性和重复性,适用于牛瑟氏泰勒虫P33基因的临床实验室鉴别.
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