【摘 要】
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迄今文献中报道枯草杆菌基因克隆化都采用枯草杆菌１６８株及其突变体。采用我国分离的枯草杆菌Ｋｉ－２及其突变体Ｋｉ—２—１３２（Ｔｈｒ－．Ｉｌｅ－．Ｖａｌ－）和地衣芽孢杆菌ＮＭ１０５为ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ的受体菌株，用酸酚法提纯ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ，在琼脂糖凝胶电
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迄今文献中报道枯草杆菌基因克隆化都采用枯草杆菌１６８株及其突变体。采用我国分离的枯草杆菌Ｋｉ－２及其突变体Ｋｉ—２—１３２（Ｔｈｒ－．Ｉｌｅ－．Ｖａｌ－）和地衣芽孢杆菌ＮＭ１０５为ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ的受体菌株，用酸酚法提纯ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ，在琼脂糖凝胶电泳上看不到样品中有染色体ＤＮＡ的带。结果表明，Ｋｉ－２．Ｋｉ－２－１３２．ＮＭ１０５都可作ｐＲＩＴ—５质粒的受体菌，其转化频率在１０－３～１０－５之间，因菌株和条件不同，频率有所差异，Ｋｉ－２－１３２的转化效率为每微克ＤＮＡ可产生１０４转化体。从ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ转化Ｋｉ－２、Ｋｉ－２－１３２、ＮＭ１０５的转化体中提取的质粒ＤＮＡ仍具有ｐＲＩＴ—５质粒ＤＮＡ的抗氯霉素（Ｃｍｒ）的转化活性。从转化体提纯的质粒ＤＮＡ的电泳图以及ＣｌａＩ消化后的电泳图与原来的ｐＲＩＴ—５ＤＮＡ的电泳图相同。
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