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DNA甲基化是一种比较稳定的表观遗传修饰,已有的研究表明,DNA甲基化修饰对植物的生长、发育和逆境抗性等有至关重要的作用。目前对DNA甲基化产生过程的研究已经比较深入,但是对于DNA去甲基化机理的研究仍比较浅显。为了完善植物DNA去甲基化的分子机制,本研究以包含2×35S:LUC(luciferase)报告基因的拟南芥(Arabidopsis thaliana)转基因系Col-LUC为遗传筛选的起始亲本材料,将此亲本系进行甲基磺酸乙酯(ethyl methanesulfonate,EMS)诱变,从自交的M2代群体中筛选到了一株低荧光的突变体,命名为rll2(reduced LUC luminescence 2),此突变对应的野生型基因因此被命名为RLL2。与高荧光的Col-LUC亲本系相比,rll2突变体荧光强度明显降低。在生长发育方面,rll2突变体表现出明显的发育缺陷,如植株变矮、生长势明显比Col-LUC差。遗传学分析表明,rll2突变体携带一个细胞核单基因隐性突变。图位克隆结果表明,候选基因RLL2定位于5号染色体CL506-B14M1和CL507-B6M1两个分子标记之间,这两个分子标记分别位于F5O24和T6G21两个细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)克隆上。酶切-PCR(Chop-PCR)结果表明,rll2突变体中染色体上一些位点的DNA甲基化水平明显升高。反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)结果显示,rll2突变体中,RNA介导的DNA甲基化(RNA-directed DNA methylation,RdDM)途径的几个内源靶基因的表达有不同程度的降低。综上所述,本研究筛选到一株低荧光候选突变体rll2,并初步定位了RLL2基因;实验结果表明,其很可能参与了DNA去甲基化过程。这一研究为深入探索DNA去甲基化的分子机理提供了理论依据。