人乳头瘤病毒E6E7基因重组腺病毒的构建及鉴定

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zz33xx

【摘要】

：

目的：利用AdEasy系统构建人乳头瘤-16（HPV-16）E6E7基因重组腺病毒，并通过Western Blot方法检测E6E7蛋白的表达．方法：将质粒pET-32a（＋）-E6E7扩增、酶切获得E6E7片段插入腺病毒穿梭载体

【作者】

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潘巍巍成海恩赖国旗易发平马永平宋方洲

【机构】

：

重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,重庆医科大学实验动物中心,重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室

【出处】

：

第四军医大学学报

【发表日期】

：

2006年24期

【关键词】

：

人类乳头状瘤病毒人腺病毒科 papillomavirus human adenoviridae

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30371479）,重庆市教委资助（渝教科[2005]12号）,教育部“春晖计划”资助（Z2004-1-55103）

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目的：利用AdEasy系统构建人乳头瘤-16（HPV-16）E6E7基因重组腺病毒，并通过Western Blot方法检测E6E7蛋白的表达．方法：将质粒pET-32a（＋）-E6E7扩增、酶切获得E6E7片段插入腺病毒穿梭载体质粒pAdTrack-CMV的巨细胞病毒（CMV）启动子下游，构建重组穿梭载体pAdTrack-CMV-E6E7，线性化后与骨架载体AdEasy-1在细菌BJ5183内同源重组得到腺病毒质粒pAd-E6E7，经人胚肾293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒Ad-E6E7；用包装后的

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