【摘 要】
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[目的]通过建立小鼠胃癌模型,探讨幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Hp-NAP)对免疫细胞Th17/Treg的调节作用,以及是否通过影响其平衡来抑制胃癌的发展.[方法]①18只6周龄SPF级正常雄性615系小鼠,随机分为健康对照组、胃癌阴性处理组(简称胃癌组)、胃癌干预组(简称干预组).胃癌组及干预组均于小鼠右下肢根部皮下注射7×106/μl mfc细胞200 μl,干预组分别于第0、3、6、9、12天给予瘤旁注射0.4μg/μlHp-NAP 150 μl,胃癌组于同一时间给予瘤旁注射150 μl磷酸盐缓冲
【机 构】
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武汉科技大学附属天估医院消化内科,湖北武汉430064;华中科技大学协和医院消化内科,湖北武汉430022
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[目的]通过建立小鼠胃癌模型,探讨幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Hp-NAP)对免疫细胞Th17/Treg的调节作用,以及是否通过影响其平衡来抑制胃癌的发展.[方法]①18只6周龄SPF级正常雄性615系小鼠,随机分为健康对照组、胃癌阴性处理组(简称胃癌组)、胃癌干预组(简称干预组).胃癌组及干预组均于小鼠右下肢根部皮下注射7×106/μl mfc细胞200 μl,干预组分别于第0、3、6、9、12天给予瘤旁注射0.4μg/μlHp-NAP 150 μl,胃癌组于同一时间给予瘤旁注射150 μl磷酸盐缓冲液,第14天处死小鼠并剥离肿瘤.②比较肿瘤的大小及检测瘤体内血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达情况.③流式细胞技术检测各组小鼠脾脏组织中Th17、Treg细胞的数量.④RT-PCR法检测瘤体组织中IL-17、ROR-γt、foxP3 mRNA表达情况.[结果]①肿瘤蜡块标本组织切片苏木精-伊红染色可见大量核大深染并有核分裂像的癌细胞;干预组瘤体平均体积(0.291 cm3)较胃癌组(0.409 cm3)小,而且胃癌组有1例出现腹腔转移和血性腹水形成;干预组瘤体组织中VEGFmRNA表达及血管密度明显低于胃癌组(P＜0.01).②胃癌组脾脏组织中Th17、Treg细胞数明显高于健康对照组(P＜0.05),干预组Th17细胞数量也明显高于胃癌组(P＜0.05);而干预组与胃癌组脾脏组织中Treg细胞数无明显差异(P＞0.05).③干预组瘤体组织中IL-17、ROR-γt mRNA表达明显高于胃癌组(P＜0.05,P＜0.01),而foxP3 mRNA表达无明显差异(P＞0.05).④干预组瘤体组织中IL-17蛋白水平较胃癌组明显增高(P＜0.05),而TGF-β表达无显著差异.[结论]Hp-NAP可能通过增加外周Th17细胞表达及肿瘤微环境中IL-17的浸润直接或间接抑制了胃癌的进展.
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