A型魏氏梭菌α毒素Asp-56基因定点突变与结构分析

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为探索A型魏氏梭菌α毒素第56位天冬氨酸(Asp-56)对其生物学活性的影响,将仪毒素Asp-56密码子(GAT)定点突变成甘氨酸(Gly-56)密码子(GGT),构建了含α毒素D56G突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)(pM—D56G),该突变体蛋白表达量约为22.48%。仅毒素和仅毒素D56G突变体蛋白的二级结构主要由仅螺旋和无规则卷曲组成,两者的圆二色(CD)光谱检测有微小变化。生物学活性检测结果表明,仪毒素D56G突变体蛋白失去了α毒素的磷脂酶C活性,且仪毒素D56G突变体蛋白免疫的小鼠
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