【摘 要】
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目的获得JEV E蛋白基因并使其在E.coli中高效表达,以研究其抗原活性,为进一步研制ELISA早期诊断试剂盒奠定基础.方法根据已发表的JEV SA-14-14-2减毒株序列,设计一对特异性引
【机 构】
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南京农业大学动物医学院传染病组农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,南京农业大学动物医学院传染病组农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏省农业科学院畜牧善医研究所,沈阳农业大学畜牧兽医学院动物医学系
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目的获得JEV E蛋白基因并使其在E.coli中高效表达,以研究其抗原活性,为进一步研制ELISA早期诊断试剂盒奠定基础.方法根据已发表的JEV SA-14-14-2减毒株序列,设计一对特异性引物,通过RT-PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段,并将其克隆入pET-32a(+)表达载体中,构建重组融合表达载体pET-E,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导获得高效表达.结果扩增的E蛋白基因片段长1113bp,编码371个氨基酸残基,该基因片段与国内发表的减毒株SA14-14-2碱基序列同源性
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