利用PCR法从文库中快速克隆人促红细胞生成素基因

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本文介绍一种利用 PCR 技术从基因文库中快速克隆基因组 DNA 的方法。含有107个克隆的人基因文库分成10份,小量提取 DNA,利用特异性的寡核苷酸引物检测 EPO 基因的存在与否。经过4轮 PCR 筛选,从阳性管中取103个噬菌体进行铺板培养,经原位杂交获得含有 EPO 基因的阳性克隆。阳性克隆的插入片段被亚克隆到质粒上。酶切分析及序列分析的结果均证明我们获得了 EPO 基因。PCR—筛库法可以快速从文库中获得目的基因并节省大量的人力和资金,此方法同样适用于 cDNA 及 YAC 文库的筛选。
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