【摘 要】
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旨在建立一种碘量法,用于对多种β-内酰胺酶抑制剂的快速筛查.以舒巴坦为基准药物,采用全波长扫描确定最佳测定波长,棋盘滴定法及单因素实验确定最佳工作条件,绘制舒巴坦标准
【机 构】
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广东第二师范学院生物与食品工程学院,广东广州510303;广东省生物工程研究所(广州甘蔗糖业研究所),广东广州510303
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旨在建立一种碘量法,用于对多种β-内酰胺酶抑制剂的快速筛查.以舒巴坦为基准药物,采用全波长扫描确定最佳测定波长,棋盘滴定法及单因素实验确定最佳工作条件,绘制舒巴坦标准曲线,通过测定药物的交叉反应率,考察了该方法对4种常见β-内酰胺酶抑制剂的检测灵敏度.结果 显示,最佳工作条件为测定波长585 nm、青霉素酶浓度1.0×104 U/mL、青霉素G钾浓度0.2 g/L、碘液浓度0.3 g/L、淀粉浓度1％、反应pH6.0、反应温度37℃、孵育时间20 min、催化时间30 min;对舒巴坦的检出限(LOD,IC10)为410.13 μg/kg,半抑制浓度(IC50)为2522.08 μg/kg,线性范围(IC20～IC80)为801.79～7933.30 μg/kg;对克拉维酸、他唑巴坦、阿维巴坦的交叉反应率分别为454.17％、574.30％、2319.79％,检出限分别为224.64、67.56、42.86 μg/kg.该研究提供了碘量法检测β-内酰胺酶抑制剂体系的优化方法,可实现在60 min内完成对多种β-内酰胺酶抑制剂的快速筛查.
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