【摘 要】
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禽腺病毒(FAdV)是世界范围内流行的禽类常见传染病病原,2015年暴发的由新型血清4型禽腺病毒(FAdV-4)引起的急性传染病,给养殖户造成巨大的经济损失.为做到早期诊断和检测,并防控、净化该病毒病,本试验利用Fiber-2蛋白建立了检测FAdV-4的ELISA方法.根据禽腺病毒4型SDJN0105株Fiber-2基因的核苷酸序列,经序列优化后合成1440 bp基因序列,连入pET-30a(+)载体构建pET-30a(+)-Fiber-2重组质粒,在BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达Fiber-2蛋
【机 构】
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青岛农业大学动物医学院/山东省预防兽医学重点实验室,山东 青岛 266109;山东省农业科学院家禽研究所,山东 济南 250100;山东省农业科学院家禽研究所,山东 济南 250100;青岛农业大学动
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禽腺病毒(FAdV)是世界范围内流行的禽类常见传染病病原,2015年暴发的由新型血清4型禽腺病毒(FAdV-4)引起的急性传染病,给养殖户造成巨大的经济损失.为做到早期诊断和检测,并防控、净化该病毒病,本试验利用Fiber-2蛋白建立了检测FAdV-4的ELISA方法.根据禽腺病毒4型SDJN0105株Fiber-2基因的核苷酸序列,经序列优化后合成1440 bp基因序列,连入pET-30a(+)载体构建pET-30a(+)-Fiber-2重组质粒,在BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达Fiber-2蛋白,利用亲和层析柱纯化重组Fiber-2蛋白,经SDS-PAGE和Western-Blot鉴定后,以Fiber-2蛋白作为包被抗原,通过反应条件优化建立检测禽腺病毒4型抗体的间接ELISA方法.结果表明,获得了以上清形式表达的重组Fiber-2蛋白,Western-Blot鉴定表明重组Fi-ber-2蛋白具有良好的免疫学活性;重组Fiber-2蛋白的最佳包被浓度为4.0μg/mL,待检血清最佳稀释度为1:400;该方法特异性好,仅与禽腺病毒4型阳性抗体发生反应,敏感度可达1:6400;批内和批间重复性变异系数均小于5％;构建的间接ELISA试剂盒在4℃环境下放置12个月仍然有效.本研究建立的禽腺病毒4型抗体间接ELISA检测方法特异性强、敏感性高、重复性好、保质期长,可用于禽腺病毒4型的监测和流行病学调查.
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为了解不同品种苹果果实发育进程中酚类物质含量和抗氧化能力的变化规律,以砧木品种山定子、红皮红肉苹果红满堂和非红肉苹果富士不同发育时期的果实为试材,测定其花青素、总酚、类黄酮、原花青素、黄烷醇含量及DPPH自由基清除能力、铁离子还原/抗氧化能力、ABTS+自由基清除能力.结果表明,3个苹果品种的总酚、类黄酮、原花青素含量及抗氧化能力以幼果期较高,随发育进程总体呈减少趋势;花青素含量则随果实发育进程呈增加趋势;黄烷醇含量的变化趋势则表现为山定子和红满堂成熟期较高,而富士幼果期较高.品种间比较,山定子具有较高的
为给黄河三角洲盐碱地区小麦高效栽培提供理论依据,本试验采用随机区组设计,设灌溉水含盐量分别为0 g/L(淡水,对照)、2、3、4 g/L 4个微咸水浓度处理,研究拔节期补灌对土壤盐分、小麦衰老生理和农艺性状指标的影响.结果表明,微咸水浓度为2g/L时,土壤盐分分布与淡水无异,3g/L和4g/L时土壤上层(0～60 cm)积盐严重;2 g/L微咸水灌溉小麦旗叶的光合速率、千粒重、产量、收获指数及丙二醛含量与对照无显著差异,而脯氨酸含量和超氧化物歧化酶活性显著高于0、4g/L处理.4g/L微咸水灌溉小麦株高、
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为探究生物有机肥替代化肥对黄淮地区典型土壤团聚体及其有机碳的影响,采用室内培养试验,研究了砂姜黑土团聚体及有机碳的含量和稳定性对生物有机肥不同替代量(0、5％、10％、20％和30％,分别记为BF0、BF5、BF10、BF20和BF30)的响应.结果表明,生物有机肥施用后5 mm团聚体有机碳含量增加最为显著.生物有机肥替代化肥后,>5、0.25～0.5 mm和<0.25 mm团聚体有机碳贡献率均降低,2～5、1～2 mm和0.5～1 mm团聚体有机碳贡献率则增加,BF20和BF30对团聚体有机碳贡献率的影
采用盆栽试验,以鲁丹参2号为材料,以每盆基施复合肥(N-P2O5-K2O=15-15-15)1.5 g为基础,设置6个施用处理:对照(CK);腐植酸9000 kg/hm2(T1);碱活化腐植酸9000 kg/hm2(T2);微生物菌剂4500 kg/hm2(T3);腐植酸9000 kg/hm2+微生物菌剂4500 kg/hm2(T4);碱活化腐植酸9000 kg/hm2+微生物菌剂4500 kg/hm2(T5),研究各处理对丹参幼苗生长和光合作用的影响.结果表明,施用腐植酸、碱活化腐植酸、微生物菌剂均能促
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