【摘 要】
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采用饱和硫酸铵盐析、SephadexG-200柱层析和离子交换柱层析技术,从猪初乳中提纯分泌型IgA(SIgA).经SDS-PAGE电泳鉴定,纯化的SIgA达到电泳纯.以此纯化的SIgA,采用长程免疫法
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30270990);江苏省高新技术项目(BG2002317);教育部回国人员基金项目(G200211);浙江省攻关项目(021102529)
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采用饱和硫酸铵盐析、SephadexG-200柱层析和离子交换柱层析技术,从猪初乳中提纯分泌型IgA(SIgA).经SDS-PAGE电泳鉴定,纯化的SIgA达到电泳纯.以此纯化的SIgA,采用长程免疫法免疫BALB/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合,第1次融合率为79.7%,第2次融合率为60.3%.建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体,初检阳性率分别为4.1%、16.8%.经2次亚克隆反复筛选获得了2株能稳定分泌抗猪SIgA单克隆抗体的
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