【摘 要】
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目的 探讨金雀异黄素(Gen)对甲状旁腺素(PTH)引起的人近曲小管上皮细胞分泌结缔组织生长因子(CTGF)的调控作用.方法 应用实时定量PCR、Western印迹、报告基因等技术,观察Gen
【机 构】
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济南军区总医院肾内科,上海交通大学附属第一人民医院肾内科
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目的 探讨金雀异黄素(Gen)对甲状旁腺素(PTH)引起的人近曲小管上皮细胞分泌结缔组织生长因子(CTGF)的调控作用.方法 应用实时定量PCR、Western印迹、报告基因等技术,观察Gen对PTH诱导人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞CTGF表达的影响.采用凝胶迁移实验(EMSA)技术检测PTH刺激HK-2细胞后NF-κB的DNA结合能力;使用信号通路抑制剂阻断信号通路以明确Gen发挥作用的机制.结果 HK-2细胞有基础量的CTGF mRNA和蛋白表达,PTH刺激后其表达量显著增加(均P<0.05),Gen能下调PTH诱导的HK-2细胞CTGF表达.10-10 mol/L PTH作用12 h后,荧光素酶活性较对照组显著升高(1.89±0.08比0.99±0.03,P<0.01).正常情况下,胞核内NF-κB处于无活性状态,PTH刺激HK-2细胞后NF-κB的DNA结合能力明显增强,10-10 mol/L PTH作用30 min时NF-κB活性达到高峰.NF-κB通路抑制剂PDTC预处理HK-2细胞后,PTH诱导细胞CTGF表达较PTH组明显下降(P<0.01).Gen抑制PTH所致的HK-2细胞NF-κB活化.结论 Gen通过阻断NF-κB信号通路抑制PTH诱导的HK-2细胞CTGF表达从而延缓肾间质纤维化.
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