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提取猪日本乙型脑炎病毒（JEV）上海分离株的基因组RNA，反转录合成cDNA，扩增JEV-NS5基因片段，亚克隆到原核表达载体pET-28（a）上，构建重组原核表达质粒pET-28（a）-JEV-NS5，转化大肠埃希氏菌B121（DE3）菌株，IFrG诱导表达重组JEV—NS5蛋白，获得分子质量为103ku的重组蛋白．该蛋白主要以包涵体形式表达，表达量占总菌体蛋白的35％以上，His．bandNi＋纯化后，获得高纯度重组蛋白占总蛋白的比例达75％以上．以纯化的蛋白免疫小鼠，制备小鼠抗JEV．NS5抗体，抗