入托体检中干化学法检测ALT的质量控制

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  丙氨酸氨基转移酶(ALT)是健康体检的重要项目之一,是人体中多种氨基酸转移酶的一种,广泛存在于人体各种组织、器官、肌肉、骨骼中,以肝细胞的胞浆中含量最多,正常情况下,只有少量释放入血液中,当组织或器官病变时,就会使其释放到血液中,导致ALT升高。在2010年卫生部出台的托幼机构管理办法中,明确规定入园儿童必须检查ALT,而每年的入托体检时间又相对集中,而以往传统的检查方法是抽取静脉血,儿童与家长不愿意配合,且效率低下。干化学法检测具有快速、简便、用血量少等优点,已广泛用于儿童入托体检中,因而做好ALT快速检测的质量控制就显得尤为重要。
  1 检验前的质量控制
  1.1 人员管理
  凡上岗人员必须具备相应资质,要对操作人员进行仪器设备和实验项目的操作培训,使检测人员熟练掌握试验原理和操作步骤,包括加样量、加样时间及对结果的判断等。?因所检测的对象为儿童,工作人员的责任心,操作熟练程度及工作经验是实验成功的关键,需掌握一定的沟通技巧,保证采血过程中的顺畅,以确保血液不凝固,以及采样量的准确。
  1.2 检测对象的准备
  因检测对象为2-6岁的幼儿,小孩家长必须配合检验人员安抚好小孩的情绪,让小孩配合好检验人员顺利完成血样采集。检查前一般要求空腹,且要避免近期有感冒服用药物的经历,因为服用感冒药物会对检测结果产生影响[1]。
  1.3 仪器的保养及校准
  把仪器放置于小孩触碰不到的地方,防止在测试的过程中被小孩触碰移动或关闭电源。保证仪器处于适宜的工作环境,环境温度低于或高于设备的工作环境温度时应对环境温度进行调节,温度过低时,应待室内温度升高后再开机,缩短预热时间。仪器必须置于平整的台面上,避免倾斜晃动,轻拿轻放,避免剧烈震动,保证光源的稳定性。定期对仪器进行清洁维护,用无水乙醇对试纸槽及光源孔进行擦拭清洁。每天开机后,在标本检测前,必须按规定用随机配套的标准质控条进行检测,确保仪器各项性能指标正常,定期使用质控血清进行质量控制和校准。
  1.4 试剂与材料的管理
  按规定使用与仪器相配套的试剂,试剂应严格按储存要求存放。对于我单位使用的艾康Mission TM c100干式化学分析仪,其主要的试剂为试纸条,在测试前应检查生产批号,严禁使用已过期的试纸条,查看试纸条有无破损,测试区有无污染、变色。不可用手触摸到试纸条的试剂块部分,避免污染试剂块。在测试前应检查配套芯片编码与分析仪上显示的编号,以及测试条筒上标注的编号是否一致,避免不匹配使用,造成结果偏差。每取出一条试纸条后,应盖好筒盖,防止其长时间与空气光线接触,避免受潮。使用的微量采血管必须经过校验,保证其误差在2%以内,且内壁光滑,无破损。
  2 检验中的质量控制
  2.1 采样及加样
  在样本采集过程中,应待消毒剂干燥后方可进行穿刺,且穿刺深度应达到2-3MM,让血液自行流出,切勿用力挤压,防止混入组织液对结果造成影响[2]。在吸样过程中,要确保吸样量的准确。加样过程中,应垂直缓慢均匀的加入加样区,防止血样溅到加样区外,不可按压加样区,否则会影响加样区的吸附作用。
  2.2 检验
  打开机器仓盖,在30S秒内把加好样的试纸条放入反应槽中,注意试纸条上的圆孔务必套在反应槽的短柱上,固定好试纸条,保证试纸条放置在反应槽的正中间,使反应区垂直于光源,整个检测时间为120S,在这个过程中,应避免关闭电源或开启仓盖,否则实验会终止,且结果会受到影响。
  3 检验后的质量控制
  及时记录检测结果,核对检验单上的编号与仪器上的序号是否一致,在同时有多台仪器工作是,要给仪器编号,防止结果填错。对于高于正常值的结果,建议重新采样检测,排除由于个别试纸条的质量问题而对小孩家长造成不必要的紧张心理,同时取出试纸条,观察反应区颜色是否均匀,如果不均匀,应该重新取样复查,若反应区无颜色,说明样品没有到达反应区进行反应,也应该重新采样进行复查。对于复查后结果还是高的小孩,要交代其家长带其进一步检查,查找原因。
  4 小结
  干式化学法快速检测系统采用丙酮酸氧化酶法相关原理检测ALT,反应原理为a-酮戊二酸和L-丙氨酸在ALT的催化作用下转化成丙酮酸和谷氨酸,丙酮酸与磷酸根、氧等在丙酮酸氧化酶作用下氧化生成乙酰磷酸和过氧化氢,而生成的过氧化氢具有强氧化性,可将还原态指示剂氧化使之颜色发生变化。丙酮酸氧化酶法也属于速率法,检测速度快,精密度较好,是目前干式生化仪检测ALT常用的方法[3]。通过对检验的全程质量控制,保证检测结果的准确性,提高工作效率,对早期发现小孩疾病具有重要意义。
  参考文献
  [1] 王诗瑾,钱庆文,钱书虹?.?实验诊断与药物干扰 . 郑州:郑州大学出版社 , 2002年
  [2] 中华人民共和国卫生部医政司 全国临床检验操作规程(第4版)人民卫生出版社2015年4月
  [3] 朱楷,梁中会.干化学快速检测系统在无偿献血者ALT初筛中的应用.中国输血杂志2011,24(2):129-130.
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