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[摘要] 目的 探讨不同蛋白沉淀方法对尿液标本蛋白电泳效果的影响。方法 采集尿液标本8份,分别采用丙酮沉淀法、TCA/丙酮沉淀法及ACN/TFA沉淀法对尿液标本进行蛋白沉淀,然后进行双向电泳,比较3种标本处理方法后蛋白电泳蛋白点数及图像清晰程度。结果TCA/丙酮沉淀后电泳图谱清晰,丙酮沉淀法及ACN/TFA沉淀后单边电泳图谱具有较多横纹干扰条带,尿液标本TCA/丙酮沉淀后电泳蛋白点数高于丙酮沉淀法及ACN/TFA沉淀法,差异具有统计学意义。结论 在丙酮沉淀前应用TCA可以消除干扰等电聚焦的盐类物质,进一步降低标本的导电能力,并且能够最大程度地提取尿液中的蛋白质。
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1.4.3 图象分析 图像分析采用Quantity one蛋白分析软件,分析过程包括通过自动检测和手工标记进行蛋白质斑点检测。
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