【摘 要】
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昆虫GABA受体(γ-aminobutyric acid receptor,GABAR)是杀虫剂的重要靶标之一。本研究以黑腹果蝇Drosophila melanogaster整体组织的cDNA作为模板,采用RT-PCR技术扩增了黑腹
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(20872093,21172147);上海市教委基金项目(11ZZ122)
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昆虫GABA受体(γ-aminobutyric acid receptor,GABAR)是杀虫剂的重要靶标之一。本研究以黑腹果蝇Drosophila melanogaster整体组织的cDNA作为模板,采用RT-PCR技术扩增了黑腹果蝇GABA受体LCCH3亚基和GRD亚基的cDNA序列,并克隆至pET-32a表达载体上,测序结果表明获得的序列与基因库中已发表的序列一致性在99%以上,无移码突变。在IPTG的诱导下,LCCH3基因成功在大肠杆菌Escherichia coli中表达,而GRD基因未表达。通过包涵体洗涤、变性、Ni2+亲合层析纯化、稀释复性获得纯化的重组表达的LCCH3蛋白,并用圆二色谱测定了目标蛋白的二级结构,主要富含β结构。该研究结果为研究昆虫GABAR的结构和功能关系提供了重要的参考数据。
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