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目的
利用核素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选幽门螺杆菌(Hp)感染相关胃癌的差异蛋白,以便寻找胃癌的生物学标志物和药物治疗靶标。
方法分别收集人胃癌细胞HGC-27及与Hp共培养24 h的HGC-27的各组蛋白,iTRAQ试剂标记后利用强离子交换柱(SCX)分离,经串联质谱鉴定及相对定量;同时通过查阅Pubmed数据库中1995年1月至2014年7月公开发表的文献,其中使用任一种差异蛋白质组学方法鉴定Hp感染相关胃癌的差异蛋白;将iTRAQ数据与文献报道数据进行荟萃分析,对获得的差异蛋白采用PANTHER数据库进行基因功能聚类(GO)分析、PANTHER蛋白分类及路径(Pathway)分析。
结果通过iTRAQ标记鉴定出Hp感染相关胃癌细胞HGC-27的差异蛋白共47个,其中下调表达的37个,上调表达的10个。通过文献检索共纳入符合要求的文献7篇,其中2个以上实验室(包括iTRAQ实验)重复发现的蛋白为21个。将iTRAQ数据与文献报道数据荟萃分析得到65个差异蛋白,进行GO分析显示,生物学过程主要集中在细胞组分重组和各种代谢过程;分子功能主要集中在核酸、DNA结合,具有催化活性和转移酶活性;PANTHER蛋白分类主要为分子伴侣、结合蛋白、骨架蛋白、转氨酶和转录因子; Pathway分析显示差异蛋白主要参与帕金森疾病通路、凋亡信号通路和促性腺激素释放激素(Gn-RH)通路。
结论筛选出多种与Hp感染相关胃癌的差异蛋白,为胃癌患者的早期诊断提供可能的生物学标志物和药物治疗的靶标。