【摘 要】
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利用国际上最新的两种基于CRISPR/Cas9的BE3(Cytosine base editor,CBE)和ABE7.10(Adenine base editor,ABE)单碱基修饰技术对猪基因组靶基因位点进行编辑效率的分析研究。设
【机 构】
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深圳华大三生园科技有限公司,深圳市华大农业应用研究院,深圳动物基因组辅助育种工程实验室
【基金项目】
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大鹏新区产业发展专项资金项目(KY20160305),深圳市卫计委医疗卫生“三名工程”(SZSM201512003),深圳市基因组辅助育种工程实验室提升项目
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利用国际上最新的两种基于CRISPR/Cas9的BE3(Cytosine base editor,CBE)和ABE7.10(Adenine base editor,ABE)单碱基修饰技术对猪基因组靶基因位点进行编辑效率的分析研究。设计、合成并构建4个猪基因组靶基因位点gRNA表达载体,分别与CBE或ABE共转染PK15细胞,继续培养48 h,结合二代测序技术测定单碱基替换效率和indels发生率。结果表明,单碱基编辑系统BE3和ABE7.10对猪基因组靶位点碱基修饰的活性编辑窗口主要分别为5个核苷酸和4个
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