【摘 要】
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目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对β-淀粉样蛋白(Aβ)25-35刺激下的小鼠小胶质细胞系BV-2中核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:将对数期生长的BV-2细胞分为4组:正常细胞组(不做
【机 构】
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温州医科大学附属第二医院育英儿童医院麻醉科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.81271204);浙江省自然科学基金资助项目(No.LY17H090015);浙江省科技厅公益项目(No.2016C37098)
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目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对β-淀粉样蛋白(Aβ)25-35刺激下的小鼠小胶质细胞系BV-2中核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:将对数期生长的BV-2细胞分为4组:正常细胞组(不做任何处理)、模型组(加入40μmol/L Aβ25-35)、RNA干扰组(采用RNA干扰HMGB1后加入40μmol/L的Aβ25-35)和溶剂对照组(加入终浓度为0.1%的DMSO)。各组细胞孵育72 h后(Aβ25-35处理24 h)采用Western blot法检测HMGB1和NF-κB p65的蛋白表达情况。结果:CCK-8结果显示40μmol/L Aβ25-35为最佳造模浓度。选择30 nmol/L带GFP荧光基团的HMGB1-siRNA转染BV-2细胞,转染效率约为80%90%。Western blot实验结果显示,HMGB1-siRNA片段干扰后BV-2细胞中HMGB1的表达明显降低(P<0.05);Aβ25-35刺激BV-2细胞后,胞内HMGB1和核内NF-κB p65表达均明显升高(P<0.05),HMGB1-siRNA作用后,HMGB1和核内NF-κB p65表达均明显下降(P<0.05)。结论:RNA干扰HMGB1表达可减少Aβ25-35刺激的BV-2细胞核内NF-κB的表达。
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