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目的 利用比较蛋白质组学双向电泳技术研究体系来观察血管紧张素受体拮抗剂(ARB)氯沙坦对自发性2型糖尿病KKAy小鼠肾小球蛋白表达谱的影响.方法 8周龄自发性2型糖尿病KKAy小鼠随机分为氯沙坦治疗组(饮用水中喂入氯沙坦粉末10 mg+kg-1·d-1)和非治疗组;8周龄C57BL/6小鼠作为正常对照组.饲养12周后,经胸主动脉磁珠灌流分离肾小球,提取肾小球蛋白.DIGE最小荧光标记法标记,行二维荧光差异凝胶电泳.应用Typhoon多功能成像系统扫描凝胶,DeCyder 2D差异分析软件进行图像分析.采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达蛋白质.结果 KKAy小鼠的体质量、血糖和尿白蛋白排泄率较正常对照C57BL/6小鼠显著升高(均P＜0.05),氯沙坦治疗显著改善2型糖尿病KKAy小鼠尿白蛋白肌酐比[(539.71±100.23)mg/g比(728±177.19) mg/g]、肾小球基底膜增厚和系膜基质增生等肾脏病理损害,而对血糖无影响.通过DeCyder 2D差异分析软件,发现KKAy氯沙坦治疗组与KKAy非治疗组肾小球内表达差异大于1.1倍的蛋白质斑点62个.经肽质量指纹图分析,鉴定出41种蛋白质.其中表达上调的蛋白28种,包括甘油激酶、亚硫酸盐氧化酶、甘氨酸脒基转移酶、腺苷高半胱氨酸酶等;表达下调的蛋白质13种,包括3-巯基丙酮酸硫基转移酶、ATP合酶亚单位d、60 000热休克蛋白、线粒体应激蛋白70(又名75 000葡萄糖调节蛋白,GRP75)等.有6种蛋白在20周龄KKAy小鼠和C57BL/6小鼠肾小球内存在差异表达,氯沙坦治疗抑制了其在糖尿病状态下的表达变化,包括丙酮酸脱氢酶复合物的二氢硫辛酰赖氨酸残基乙酰基转移酶组分、琥珀酰辅酶A连接酶[GDP-形成]亚单位β、ATP合酶亚单位d、GRP75、核苷二磷酸盐结合部分X模体19和硒结合蛋白1.结论 氯沙坦可明显减轻KKAy小鼠尿白蛋白排泄率和肾脏病理损害;可抑制糖尿病状态下肾小球ATP合酶亚单位d、GRP75、硒结合蛋白1等蛋白的表达变化;可能通过减少线粒体活性氧簇产生,抑制氧化应激反应发挥其肾脏保护作用.